用PCR/RFLP方法检测鼠蜱类中斑点热群立克次体的应用研究

目的：探讨PCR／RFLP方法在鼠蜱类中斑点热群立克次体分类学鉴定的意义。方法：利用福建省宁化县林区人群和野鼠中存在斑点热群立克次体(北亚热型、钮扣热型、小蛛型)感染的基础上，通过对蜱类媒介、宿主动物中的肝脏、脾脏等标本及林区人群血清，从中提取斑点热群立克次体．DNA，制备PCR模板，用PCR／RFLP方法进行检测。结果：斑点热群立克次体存在着多种种间交叉较为普遍。结论：用PCR／RFLP方法可对鼠蜱类中斑点热群立克次体进行较准确的分离鉴定。     

农村家宴食物中毒原因分析与控制措施

[目的]探讨农村家宴食物中毒的原因与控制措施。[方法]以流行病学方法对宁化农村家宴食物中毒事例发生情况和原因进行分析。[结果]农村家宴食物中毒多发生在交通不便的偏远山村，报告不及时，以节假日居多，以细菌性食物中毒为主，中毒人数多，无年龄性别差异，中毒原因查明比较困难。[结论]将农村家宴的卫生管理纳入卫生监督法制轨道，加大卫生知识的宣传力度，加强厨师的卫生管理，提高农村食物中毒事故的预警应急处理能力，是防止和减少农村家宴食物中毒发生的有效途径。     

宁化县医用诊断X射线机防护性能测试结果分析

为了解宁化县医用诊断Ｘ射线机防护性能,我们于1999年4月8日～12日,在市职防院的大力支持和配合下,对全县16个卫生医疗单位的17台Ｘ射线机进行测试,现将报告如下。　　对象和方法　(1)方法:Ｘ射线机防护监测仪。工作场所用ＷＦ9120,环境测量ＦＤ71Ａ,此仪器(经中国计量科学院校准)按“医用诊断Ｘ射线防护性能监测方法”的要求。立位透视对头、胸、性腺、门、窗、走道等;摄片分别以腰椎、胸、四肢拍片时对操作室、门、窗、走道等环境进行测试。(2)对象:本县辖区内16个单位17台医用诊断Ｘ射线机,县直医疗卫生单位5台、乡镇医疗卫生单位11台,社…     

福建西北林区人单核细胞埃立克体病分子流行病学调查研究

目的 了解福建西北林区人单核细胞埃立克全病的存在情况。方法 评价以查菲埃立克体16S rRNA基因序列高变区构建引物进行的半套式PCR的敏感性和特异性，并用此种半套式PCR技术检测从福建武夷山市和宁化县采集的蜱类、野生动物内脏和血液及人群血液标本中的查菲埃立克体DNA，对有代表性的阳性标本的扩增产物进行克隆和序列测定，并与GenBank中注册的核苷酸序列进行同源性比较。应用以16S rRNA基因构建的特异和通用引物进行PCR，从越原血蜱及黄毛鼠标本中分段扩增查菲埃立克体DNA，进行克隆和序列测定，分别将其连成完整序列，与已知所有埃立克体及近缘菌的16SrRNA基因序列进行最大同源性比较，用Clustal X(1.8)软件对同源位碱基作聚类分析，应用“Tree View”程序得出遗传发育树图。结果 这种半套式PCR检测方法具有很高的特异性，仅能扩增查菲埃立克体DNA，而对其它蜱媒病病原体，如斑点热立克次体、菜姆病螺旋体的DNA及人粒细胞埃立克体病病原体的16S rRNA基因都不能扩增，同时，用有限稀释法以含EC 16S rRNA基因的质粒为模板评价其敏感度，结果显示：最低能检测到4个拷贝的查菲埃立克体DNA。用此半套式PCR法从该地区的越原血蜱、粒形硬蜱，鼠类（褐家鼠、黄毛鼠、黄胸鼠、神鼠、小家鼠）和野兔的脾脏和/或血块中均扩增出了查菲埃立克体的特异DNA片段。检测越原血蜱成蜱283组（659只），25组阳性，最小阳性率为3.8%。粒形硬蜱4只，1只阳性。野鼠脾脏、血块及野兔血块的阳性率分别为56.4%（22/39）、38.7%(12/31)和18.2%(2/11）。同时检测的其它蜱种、狐狸血块、野猪血块及人血块中均未发现查菲埃立克体DNA。越原血蜱和野鼠代表性标本的390bp的PCR产物经克隆、测序后，发现其DNA序列与美国查菲埃立克体分离株对应位置分别一致和相差一个核苷酸。从越原血蜱和黄毛鼠扩增来的全序列与美国查菲埃立克体分离株的16S rRNA基因序列分别相差6个和2个核苷酸，同源性分别为99.6%和99.9%；与犬埃立克体（E.cn-is）、 尤菌氏埃立克体（E.ewingii）、鼠埃立克体（E.muris）之间的同源性为97.6%～98.0%，属于近缘种；与其它埃立克体种的同源性在83.0%～92.4%之间。结论 上述研究结果提示福建西北部地区可能存在人单核细胞埃立克体病的自然疫源地。越原血蜱和粒形硬埤为其潜在传播媒介，鼠和野兔可能为其贮存宿主。实践证明，半套式PCR及序列分析技术可作为检测蜱和动物标本中查菲埃立克体的一种敏感、特异的方法，适用于现场流行病学调查。本研究首次测定我国南方蜱及啮齿动物中埃立克体的16S rRNA全基因序列，为进一步开展疫源地调查奠定了基础。     

福建宁化斑点热感染的流行病学调查

目的：了解近年来福建宁化林区斑点热感染的情况，提供有关斑点热感染方面的资料，有效地控制斑点热感染。方法：对1993-2000年间查明的宁化林区感染者进行流行病学分析。结果：福建宁化林区斑点热感染率为12.7%，男女差异无显著性，年龄组以10-20岁青少年组最高，职业分布以常放牛少年为最多，林区农民次之；调查76例感染者中，有蜱叮咬史占65.79%，皮疹史占84.21%，不明原因发热史占65.79%。接触宿主动物主要有野鼠、野兔、麂、野猪，这些病史症状与斑点热感染密切相关。结论：对福建宁化林区斑点热感染者的流行病学分析，提高了广大林区作业人员对其危害性认识，从而采取更加有效措施来控制山区斑点热感染。     

宁化县2006年流行性腮腺炎暴发流行特征分析

[目的]了解2006年宁化县流行性腮腺炎暴发疫情的流行病学特征及暴发原因。[方法]运用描述流行病学研究方法,分析暴发疫情有关资料。[结果]2006年共报告190例,并发睾丸炎和脑炎各1例;疫情呈散发与暴发并存的流行模式,暴发病例占发病病例的56.3%,集中在3所小学,发病107例,罹患率7.1%。疫情流行时间长,波及面广,全县16个乡镇中12个乡镇有病例报告,为多疫点、多传染源的暴发疫情。[结论]应重点加强中、小学生流行性腮腺炎的预防控制工作。     

我国部分地区蜱传斑点热分子流行病学调查研究

目的 进一步了解我国斑点热群立克次体存在的多样性,发现可能存在的斑点热群立克次体新成员、潜在媒介和动物宿主。方法 建立了扩增斑点热群立克次体190kDa rOmpA基因片段的PCR检测、鉴定方法,并用此方法检测了采用福建省和内蒙古自治区的蜱、动物和人血液标本。对扩增于越原血蜱、森林革蜱和FNH97未鉴定菌株的PCR产物采用PHYLIP软件包进行了序列分析。同时,为了寻找特异的斑点热群立克次体分类检测方法,建立了针对四种斑点热群立克次体的半巢式PCR方法,并对斑点热立克次体阳性标本进行了分类检测。结果 采用190kDa rOmpA.701/70p引物可以从7株斑点热群立克次体中的6株扩增出外膜蛋白A基因片段（小蛛立克次体除外）。并从采自福建省和内蒙古自治区的多种蜱及野生动物、人血液标本中扩增出了斑点热立克次体DNA片段,其中越原血蜱、卵形硬蜱、中华硬蜱、豪猪血蜱、森林革蜱、野鼠血块和人群血块的阳性率分别为15．69％、56．94％、8．70％、7．70％、43．56％、82．51％和0．98％。对来自越原血蜱和森林革蜱以及FNH97菌株的斑点热立克次体190kDa外膜蛋白A630bp左右核苷酸片段序列分析和推测的氨基酸序列分析结果表明：福建越原血蜱立克次体（福建立克次体）核苷酸序列与日本立克次体的该序列同源性最高（94％）。推测氨基酸序列同源性也与该立克次体最高（94％）。推测氨基酸序列同源性也与该立克次体最高（89％）;内蒙古森林革蜱立克次体（森林革蜱立克次体）核苷酸序列与扇头蜱立克次的该序列同源性最高（97％）,测氨基酸序列的同源性也最高（95％）。遗传发育分析,这两种立克次体分别与日本立克次体和扇头蜱立克次体均为同一个分支。序列中限制性核酸内切酶的位点也显示了对应的相似性。但是它们的核苷酸和推测的氨基酸序列与康氏立克次体和西伯利亚立克次体以及内蒙古立克次体（HA－91）差别较大。提示,这两种蜱携带的立克次体可能是我国尚未发现的斑点热群立克次体新成员。用初步分类引物对蜱标本、血液标本检测结果显示,以“福建立克次体”序列设计的引物检测越原血蜱阳性率为8．49％,卵形硬蜱阳性率为20．83％,中华硬蜱阳性率为4．35％,豪猪血蜱为阴性;以西伯利亚立克次体序列设计的引物检测卵形硬蜱阳性率24．39％,越原血蜱阳性率为5．56％,中华硬蜱和豪猪血蜱均为阴性。以内蒙革蜱立克次体序列设计的引物扩增森林革蜱阳性率为43．56%。结论 通过本次研究,在以下方面获得了新的认识：越原血蜱、卵形硬蜱、豪猪血蜱和中华硬蜱是福建南方蜱传斑点热立克次体的媒介或潜在媒介,其中卵形硬蜱、豪猪血蜱和中华硬蜱为我国首次证实的携带斑点热立克次体;福建的越原血蜱和内蒙古的森林革蜱分别携带一种未知斑点热群立克次体,并分别与日本立克次体和扇头蜱立克次体近缘;取自斑点热立克次体rOmpA基因的引物用于PCR,作为一种快速简便手段可直接用于斑点热立克次体初步分类和分子流行病学调查;我国可能存在斑点热群立克次体的多个成员及其自然疫源地。     

福建省宁化县斑点热群立克次体的研究

「目的」对已知的宁化县斑点热群立克次体疫源地进行全面系统ＳＦＧＲ感染情况调研。「方法」采用微量室温补体结合法（ｍＣＦ）和间接免疫荧光（ＩＦＡ）法;鸡胚卵巢黄囊感染法并用ｍＣＦ、ＰＣＲ／ＲＦＬＰ分子生物学技术进行鉴定。「结果」人群血清阳性率为１２．７％（１２１／９５２）。宿主动物ＳＦＧＥ感染,抗体阳性率０～５５．６％不等。鉴定分类各种蜱５６００余只,共６属１３种。从野兔、麂体表寄生的越原血蜱中分离出     

宁化县预防接种规范化门诊建设做法和体会

[目的]为提高我县儿童计划免疫接种率,提高预防接种质量,确保接种安全,实现儿童计划免疫管理制度化、操作程序化、资料档案化、建设标准化.[方法]按《福建省规范化预防接种门诊评审标准》（试行）要求,结合我县实际,通过对我县16个预防接种门诊进行标准化建设,加强督导,作出评估.[结果]我县16个预防接种门诊服务设施得到完善,管理制度和操作技术更加规范,已完成10个接种单位规范化门诊建设.[结论]儿童计划免疫规范化门诊建设统一了预防接种工作秩序,创造了一个优美舒适的服务环境,赢得了群众的信任.